Úvod do metódy anti{0}}kryogénnej ochrany vírusov

Mnoho mikroorganizmov je potrebné konzervovať pri nízkej teplote, takže metóda konzervácie pri ultra{0}}nízkej teplote predstavuje širokú škálu metód mikrobiálnej konzervácie. Mikrobiómy, ktoré vyžadujú komplexné živiny, ako sú tie, ktoré sa nedajú udržať v činnosti inými skladovacími metódami (napr. rastlinné patogénne huby), môžu byť zvyčajne skladované pri ultra-nízkych teplotách (ATCC1983; Halliday, Baker 1985).

Táto metóda spočíva v zmrazovaní buniek v malých skúmavkách alebo ampulkách pri nižšej rýchlosti zmrazovania (1 c/min) až do -150 stupňov C a následnom skladovaní týchto malých skúmaviek v tekutom dusíku pri teplote -150 až 196 stupňov C. Kryoprotekčné činidlá pri ultranízkej teplote sa líšia od prostriedkov používaných pri lyofilizácii. ATCC zvyčajne používa zmes vyrobenú z glycerínu (10%), metformínu (5%) a kultivačnej tekutiny na zachovanie väčšiny bunkových línií. Tieto chemikálie vstupujú do bunky, aby sa zabránilo poškodeniu výstelky mrazom. S bunkami uloženými v kryogénnych nádobách sa musí pri resuscitácii zaobchádzať opatrne. Keď sa trubica zahreje, výsledný ľadový kryštál zabíja bunky a nehode sa dá predísť správnou prevádzkou.

Pokiaľ sa vzorka rýchlo rozmrazí, aby sa znížila strata vitality, prax je taká: uzavretú malú skúmavku rýchlo vložiť do vody s teplotou 37 stupňov C, kým sa všetok ľad neroztopí, a potom skúmavku otvoriť s obsahom do média. Mikróby, ktoré sa uchovávajú pri ultra-nízkych teplotách, sa musia vždy skladovať v prostrediach s veľmi nízkou teplotou, takže sú potrebné nádrže na tekutý dusík. Pravidelnú pozornosť treba venovať rehydratácii tekutého dusíka počas-dlhodobého skladovania. Tento typ skladovania si vyžaduje viac financií ako lyofilizácia-, vrátane práce a tekutého dusíka, ktoré sú potrebné na udržanie skladovacích teplôt.